بیان توالی بهینه شده ژن زیرواحد اصلی فاکتور کلونیزاسیون i اشریشیا کولی انتروتوکسیژنیک (etec)

Authors

zahra ehsaei

biology science dept., basic science faculty, imam hossein university, tehran, iran. jafar salimian

biology dept,- basic sciences faculty- imam hossein univ. -babaie high way- tehran- iran shahram nazrian

biology science dept., basic science faculty, imam hossein university, tehran, iran maysam mansouri

biology science dept., basic science faculty, imam hossein university, tehran, iran. jafar amani

abstract

هدف: اشریشیا کولی انتروتوکسیژنیک به‏عنوان مهم‏ترین عامل اسهال و مرگ و میر در کودکان در کشورهای در حال توسعه شناخته شده است. این باکتری سالانه موجب مرگ 300 تا 500 هزار کودک زیر 5 سال می‏شود. به دلیل درمان مشکل و شیوع زیاد آن، طراحی یک واکسن مؤثر علیه این ارگانیسم از اهداف سازمان بهداشت جهانی است. پروتئین cfab به‏عنوان زیرواحد اصلی فیمبریه، نقش مهمی در اتصال باکتری به سلول‏های پوششی روده دارد و آنتی‏بادی‏های تولید شده علیه این پروتئین می‏تواند از اتصال باکتری به سطح بافت پوششی جلوگیری کند. از این رو این مولکول به تنهایی یا با سایر عوامل حدت‏زا در طراحی واکسن علیه این ارگانیسم مورد توجه بسیاری از محققین است. در این مطالعه، بیان فاکتور کلونیزاسیون b با هدف مطالعه ایمونوژنیسیته این پروتئین به‏عنوان جزئی از کاندیدای واکسن انجام شد. مواد و روش‏ها: ژن cfab با روش pcr، تکثیر و در ناقل pet28a همسانه‏سازی و بیان آن بررسی شد. با توجه به عدم بیان این ژن به‏علت وجود کدون‏های نادر، ژن cfab با استفاده از کدون‏های متداول در اشریشیا کولی بهینه‏سازی و مجدداً در ناقل pet28a همسانه‏سازی و بیان شد. نتایج: حضور باند 20 کیلودالتونی در ژل sds-page، بیان پروتئین cfab را نشان می‏داد که با روش ایمنو بلات با آنتی‏بادی anti-his tag و آنتی‏بادی ضد cfab، تأیید و با ستون کروماتوگرافی تمایلی نیکل تخلیص شد. نتیجه‏گیری: بهینه‏سازی کدون و بیان در میزبان‏های هترولوگ یک روش مفید در تولید پروتئین‏های نوترکیب به مقدار زیاد است.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

همسانه سازی، بررسی بیوانفورماتیکی و بیان ژن زیر واحد اصلی فاکتور کلونیزاسیون I اشرشیاکولی انتروتوکسیژنیک (ETEC

زمینه و هدف: اشرشیاکولی انتروتوکسیژنیک (ETEC) عامل اصلی اسهال کودکان در کشورهای در حال توسعه و مسافران به این مناطق می‌باشد. از طریق ساختارهای سطحی به نام فاکتورهای کلونیزاسیون به سلول‌های میزبان متصل می شود. اشرشیاکولی انتروتوکسیژنیک در بسیاری از مناطق شیوع فاکتور کلونیزاسیون نوع یک (CFA/I) از سایر فاکتورهای کلونیزاسیون بیشتر می باشد و این ترکیب به عنوان ترکیب کلیدی در تولید واکسن محسوب می‌گرد...

full text

همسانه سازی، بررسی بیوانفورماتیکی و بیان ژن زیر واحد اصلی فاکتور کلونیزاسیون i اشرشیاکولی انتروتوکسیژنیک (etec

زمینه و هدف: اشرشیاکولی انتروتوکسیژنیک (etec) عامل اصلی اسهال کودکان در کشورهای در حال توسعه و مسافران به این مناطق می باشد. از طریق ساختارهای سطحی به نام فاکتورهای کلونیزاسیون به سلول های میزبان متصل می شود. اشرشیاکولی انتروتوکسیژنیک در بسیاری از مناطق شیوع فاکتور کلونیزاسیون نوع یک (cfa/i) از سایر فاکتورهای کلونیزاسیون بیشتر می باشد و این ترکیب به عنوان ترکیب کلیدی در تولید واکسن محسوب می گرد...

full text

تکثیر، همسانه سازی و بررسی امکان بیان ژن زیرواحد فرعی آنتی ژن عامل کلونیزاسیون I (CFaE) از باکتری اشریشیاکولی انتروتوکسیژنیک (ETEC)

باکتری اشریشیا کلی انتروتوکسی‍‍ژنیک (ETEC) شایع ترین عامل اسهال باکتریایی کودکان زیر پنج سال و همچنین رایج ترین عامل اسهال مسافر در بالغین در دنیا است، که سالانه تعداد زیادی از کودکان را به کام مرگ کشانده و تعداد کثیر دیگری را تحت تأثیر قرار می دهد. از این رو هدف WHO تولید واکسن علیه این عامل می باشد. فیمبریه CFA/I یکی از عوامل ویرولانس مهم و شایع این باکتری است که نقش اساسی در فرآیند بیماریزای...

full text

تکثیر، همسانه سازی و بررسی امکان بیان ژن زیرواحد فرعی آنتی ژن عامل کلونیزاسیون i (cfae) از باکتری اشریشیاکولی انتروتوکسیژنیک (etec)

باکتری اشریشیا کلی انتروتوکسی‍‍ژنیک (etec) شایع ترین عامل اسهال باکتریایی کودکان زیر پنج سال و همچنین رایج ترین عامل اسهال مسافر در بالغین در دنیا است، که سالانه تعداد زیادی از کودکان را به کام مرگ کشانده و تعداد کثیر دیگری را تحت تأثیر قرار می دهد. از این رو هدف who تولید واکسن علیه این عامل می باشد. فیمبریه cfa/i یکی از عوامل ویرولانس مهم و شایع این باکتری است که نقش اساسی در فرآیند بیماریزای...

full text

بیان ژن متالوتیونین در باکتری اشریشیا کولی

سوال اساسی تحقق این بود که آیا می توان ژن متالوتیونین smta را در باکتری e. coli مورد بیان قرار داد. بدین منظور ژن متالوتیونین smta که مربوط به یک سیانوباکتری بود به کمک سنتز تسهیل شده ژن به روش واکنش زنجیره ای پلیمراز مورد ساخت قرار گرفت. سپس به درون وکتور کلونینگ ptz57r/t که از وکتورهای t/a-cloning محسوب می شود وارد گردید و بدین وسیله در سویه کلونینگ dh5? کلون گردید. در ادامه به وکتور بیانی pe...

15 صفحه اول

ایمنی زائی نانوذرات PLGAواجد پروتئین نوترکیب CfaB از اشریشیا کولی انتروتوکسیژنیک

سابقه و هدف: باکتری اشریشیا کولی انتروتوکسیژنیک، از عوامل شایع اسهال می باشد.  با بروز مقاومت آنتی بیوتیکی، ساخت ایمنوژن موثر علیه باکتری ضروری است. فاکتورهای کلونیزاسیون از مهمترین کاندیدای واکسن علیه ETEC می باشند. بارگذاری ایمنوژن های نوترکیب از جمله فاکتورهای کلونیزاسیون در نانو حاملها، سبب محافظت آنها در برابر عوامل محیطی شده، غلظتهای مناسب از ایمونوژن را فراهم و فعالیت زیستی را افزایش می ...

full text

My Resources

Save resource for easier access later


Journal title:
پژوهش های آسیب شناسی زیستی

جلد ۱۳، شماره ۴، صفحات ۰-۰

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023